La ponction d'ovocytes est une étape cruciale dans de nombreuses techniques de procréation médicalement assistée (PMA), notamment la fécondation in vitro (FIV). Cette procédure consiste à prélever les ovocytes directement des ovaires d'une femme afin de les féconder en laboratoire. Cet article explore en détail la définition de la ponction d'ovocytes, la procédure elle-même, les différentes techniques associées, ainsi que les implications et les considérations importantes pour les couples envisageant cette option.

Qu'est-ce que la ponction d'ovocytes ?

La ponction d'ovocytes, également appelée recueil, collecte ou aspiration d'ovocytes, est une intervention médicale visant à extraire les ovocytes des follicules ovariens chez une femme ayant suivi une stimulation ovarienne. Cette stimulation est un traitement hormonal par injections, qui permet d’obtenir le développement simultané de plusieurs follicules et de pouvoir prélever des ovocytes avant l’ovulation. L'objectif principal de cette procédure est d'obtenir des ovocytes fécondables qui seront ensuite mis en contact avec des spermatozoïdes en laboratoire pour créer des embryons.

Indications de la ponction d'ovocytes

La ponction d'ovocytes est une étape essentielle dans plusieurs situations cliniques, notamment :

  • Fécondation In Vitro (FIV) : La ponction est indispensable pour la FIV classique ou avec ICSI (injection intracytoplasmique de spermatozoïdes), où la fécondation a lieu en laboratoire.
  • Échecs d’IIU (Insémination Intra-Utérine) : Lorsque les inséminations intra-utérines n'ont pas abouti à une grossesse.
  • Infertilité Féminine : En cas d'endométriose, de trompes obstruées ou d'autres causes d'infertilité chez la femme.
  • Infertilité Masculine : Lorsque les paramètres du spermogramme sont altérés, diminuant les chances de fécondation naturelle.

Préparation à la ponction d'ovocytes

Avant de subir une ponction d'ovocytes, plusieurs étapes préparatoires sont nécessaires :

  1. Stimulation Ovarienne : Un traitement hormonal est administré par injections pour stimuler les ovaires à produire plusieurs follicules matures. Ce traitement dure environ 14 jours et peut impliquer :

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    • Blocage de l’ovulation par analogues de la LHRH pendant 12 jours, sous forme d’injections journalières dès le premier jour des règles, puis ajout au 3ème jour d’analogues de la stimulation par FSH ou HMG.
    • Stimulation par FSH ou HMG et ajout d’un antagoniste pour blocage de l’ovulation à jour variable (cetrorelix ou ganerelix).
  2. Surveillance : Le développement folliculaire est suivi par des échographies et des dosages hormonaux réguliers.

  3. Déclenchement de l'Ovulation : Lorsque les follicules sont matures, une injection d'hormone hCG est administrée 34 à 36 heures avant la ponction pour déclencher l'ovulation. La ponction sera réalisée 34 à 36 heures après l’injection de l’hormone hCG (qui aura les effets de LH hypophysaire), juste avant que l’ovulation ne se produise.

  4. Préparation le Jour de la Ponction :

    • À jeun : La patiente doit être à jeun depuis minuit (sans boire, manger, fumer ou mâcher de chewing-gum).
    • Documents : La patiente doit apporter sa carte vitale, un document attestant de la prise en charge à 100%, sa carte d'identité et le consentement pour la ponction.
    • Test PCR Covid négatif : Un test PCR Covid négatif de moins de 36h est requis.
    • Recueil de Sperme : Le conjoint doit se présenter au laboratoire le matin de la ponction pour effectuer un recueil de sperme par masturbation, après un délai d'abstinence de 24 heures minimum à 7 jours maximum. Il n’est pas nécessaire que votre conjoint fasse un test PCR Covid.

Déroulement de la ponction d'ovocytes

La ponction d'ovocytes est réalisée dans un bloc opératoire, généralement en hôpital de jour. Voici les étapes typiques de la procédure :

  1. Anesthésie : La ponction se fait le plus souvent sous anesthésie générale légère (sédation). Dans certains cas, une anesthésie locale peut être proposée.
  2. Accès aux Ovaires : La ponction se pratique par voie naturelle, par voie vaginale sous contrôle échographique.
  3. Aspiration des Follicules : Une aiguille fine, guidée par échographie endovaginale, est utilisée pour aspirer le liquide contenu dans chaque follicule ovarien.
  4. Récupération des Ovocytes : Chaque liquide folliculaire, pouvant contenir un ovocyte, est récupéré dans un flacon et immédiatement transféré au laboratoire.
  5. Durée : L'intervention dure en moyenne 20 à 30 minutes.

Analyse et préparation des ovocytes et du sperme

Une fois les ovocytes prélevés, ils sont immédiatement transmis au laboratoire pour analyse. Simultanément, le sperme est également préparé.

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Analyse des Ovocytes

  1. Examen Microscopique : Le biologiste examine au microscope le contenu des seringues de liquide folliculaire pour rechercher les ovocytes et vérifier leurs caractéristiques.
  2. Évaluation de la Maturité : Les ovocytes sont évalués pour leur maturité. Seuls les ovocytes matures sont capables d'être fécondés. Normalement, 85 % des ovocytes prélevés après un cycle de stimulation ovarienne sont des ovocytes matures. Les 15 % d’ovocytes restants sont immatures. Dans la plupart des laboratoires de FIV, ils sont généralement éliminés tant que la réponse ovarienne se situe dans les limites de la récupération d’un nombre d’ovocytes considéré comme normal, ce qui ne devrait pas réduire les chances de gestation. La capacité des ovocytes à être fécondés est évaluée de manière plus précise. Seuls les ovocytes matures seront micro-injectés.
  3. Mise en Culture : Les ovocytes sont ensuite transférés dans des boîtes de culture contenant un milieu nutritif, puis placés dans un incubateur à 37°C.

Préparation du Sperme

  1. Recueil : Le recueil de sperme s’effectue le matin même de la ponction, au laboratoire, dans une pièce réservée à cet effet. Une abstinence sexuelle est recommandée.
  2. Analyse : Le sperme est analysé pour évaluer la concentration, la mobilité et la morphologie des spermatozoïdes.
  3. Sélection : Le sperme est préparé de manière à sélectionner les spermatozoïdes les plus mobiles, qui sont a priori les plus fécondants.

Fécondation in vitro et culture embryonnaire

Après la préparation des ovocytes et du sperme, la fécondation in vitro peut être réalisée selon différentes techniques.

FIV Conventionnelle

Tous les ovocytes obtenus par ponction sont déposés dans des gouttes de milieu de culture disposées dans une boîte. Puis la préparation spermatique est ajoutée dans chaque goutte autour de chaque ovocyte. Les spermatozoïdes préparés sont simplement déposés au contact des ovocytes dans une boîte de culture contenant un milieu liquide nutritif et placés dans un incubateur à 37°C. Les spermatozoïdes mobiles viennent spontanément, sans aide extérieure, au contact de l’ovocyte. Mais un seul spermatozoïde fécondera celui-ci.

ICSI (Injection Intracytoplasmique de Spermatozoïdes)

Cette technique de fécondation in vitro est généralement proposée lorsqu’il existe une infertilité masculine, comme par exemple une altération de l’un des paramètres du spermogramme qui diminuerait les chances de fécondation naturelle, ou en cas d’échec de fécondation après FIV conventionnelle. Elle nécessite la sélection au microscope d’un spermatozoïde mobile, puis l’injection de celui-ci directement dans l’ovocyte mature. Il s’agit de l’injection d’un seul spermatozoïde dans l’ovocyte. La couronne de cellules qui entoure l’ovocyte est enlevée pour visualiser l’endroit où va se faire la micro-injection : c’est la « décoronisation ». Cette micro-injection est renouvelée pour chaque ovocyte fécondable. Les ovocytes sont ensuite remis dans une boîte de culture dans l’incubateur à 37°C pour les étapes suivantes.

Culture Embryonnaire

  1. Observation de la Fécondation : Le lendemain de la ponction, les ovocytes sont examinés pour savoir s’ils sont fécondés. Les ovocytes fécondés (ou zygotes) sont identifiables par la présence de deux noyaux, appelés pronuclei : l’un provient de l’ovocyte, l’autre du spermatozoïde. Tous les ovocytes ne sont pas forcément fécondés.
  2. Développement Embryonnaire : Les zygotes deviennent des embryons qui commencent à se diviser. Ils présentent normalement 2 à 4 cellules à J2 et 6 à 8 cellules à J3. Les embryons ont commencé à se diviser.
  3. Évaluation de la Qualité Embryonnaire : Le biologiste apprécie la qualité des embryons en observant leur vitesse de développement et l’aspect des cellules embryonnaires, ainsi que la présence éventuelle de « fragments » cellulaires. Ainsi, il établit un « score embryonnaire » de qualité permettant de sélectionner au mieux les embryons à transférer et à congeler.
  4. Culture Prolongée (Blastocyste) : Dans certains cas, les embryons sont maintenus en culture prolongée jusqu’à J5 - J6, qui correspond au stade « blastocyste ».
  5. Incubateur EmbryoScope® : Afin d’observer leur évolution et leur aspect morphologique (seul critère actuel d’appréciation de leur qualité) au microscope inversé, il est nécessaire de sortir les boites de culture contenant les embryons. Le centre d’AMP de Bichat s’est doté fin 2015 d’un incubateur de pointe EmbryoScope® permettant un enregistrement en continu en images (time-lapse) du développement embryonnaire préimplantatoire in vitro. L’observation accrue de l’embryon et de son développement depuis la fécondation améliore la sélection embryonnaire pour obtenir une meilleure implantation.

Transfert Embryonnaire

Le transfert des embryons dans l’utérus est réalisé 48 à 72 heures après la ponction. Vous êtes attendus en couple, au laboratoire de biologie de la reproduction munis de vos pièces d’identité. Le nombre d’embryons à transférer a été établi en consultation, après discussion avec votre médecin référent, qui prend en compte votre dossier, votre âge et le nombre de tentatives de FIV antérieures. On transfère généralement 1 ou 2 embryons.

Procédure du Transfert

  1. Préparation : La patiente est installée en position gynécologique, et un spéculum est posé.
  2. Transfert : Le médecin introduit un cathéter très fin et très souple à travers le col de l’utérus et dépose lentement les embryons au fond de l’utérus. Ce geste est indolore.
  3. Soutien de la Phase Lutéale : Pour favoriser l’implantation, un traitement hormonal à base de progestérone est prescrit, à commencer dès le soir de la ponction.

Embryons Surnuméraires et Congélation

Le nombre d’embryons obtenus peut être supérieur au nombre d’embryons transférés lorsque les couples ont donné leur consentement à ce que tous les ovocytes recueillis soient mis en fécondation. Dans ce cas, les embryons non transférés dits « surnuméraires » et présentant des critères de développement satisfaisants sont congelés. Seuls les embryons de bonne qualité seront congelés, car ils ont plus de chance de résister à la décongélation.

Lire aussi: La ponction d'ovocytes expliquée

Conservation des Embryons Congelés

Chaque année, vous aurez à informer par écrit le biologiste agréé qui conserve vos embryons de l’évolution de votre projet parental. En cas de maintien de ce projet, vous pouvez demander le renouvellement de la conservation de vos embryons. Une fois congelés, les embryons peuvent demeurer cryoconservés (congelés dans l’azote liquide) pendant plusieurs années, si nécessaire, sans crainte de voir leur qualité altérée. A Bichat, tous les embryons sont congelés par la technique de vitrification, technique de congélation ultrarapide qui permet de limiter la formation de cristaux d’eau délétères pour l’embryon.

Suivi Post-Ponction et Grossesse

Suivi Immédiat

  1. Repos : Après le transfert, vous pourrez ensuite reprendre une vie normale, en évitant les efforts trop violents. Le repos systématique n’améliore en rien les résultats.
  2. Traitement Hormonal : Continuer le traitement à base de progestérone.
  3. Contact du Laboratoire : Le lendemain de la ponction, le laboratoire d’AMP vous appellera pour vous dire le nombre d’embryons obtenus et le jour prévu du transfert.

Surveillance de la Grossesse

  1. Test de Grossesse : Le premier test de grossesse est réalisé environ quinze jours après l’insémination ou la ponction.
  2. Échographie : Une première échographie est faite environ un mois après l’insémination ou le transfert.
  3. Saignements : De légers saignements peuvent survenir au cours des premiers mois de grossesse. Contactez aussitôt votre médecin même si cela ne signifie pas systématiquement un arrêt de la grossesse. Un suivi spécifique peut parfois être instauré.

Risques et Complications Possibles

Comme toute intervention médicale, la ponction d'ovocytes comporte certains risques et complications potentiels :

  • Hyperstimulation Ovarienne : Le plus souvent, l’hyperstimulation se manifeste par une augmentation de la taille des ovaires, une gêne ou des douleurs abdominales, des nausées, des vomissements, une diarrhée. Exceptionnellement, l’hyperstimulation ovarienne peut avoir des conséquences sévères (formation de caillots sanguins).
  • Infection : Bien que rare, une infection peut survenir après la ponction ovarienne.
  • Saignements : Des saignements peuvent se produire, mais sont généralement minimes.
  • Grossesses Multiples : Le risque de grossesses multiples (et donc de prématurité) impose une mûre réflexion au sujet du nombre d’embryons à replacer.
  • Altération de la qualité du sperme, des ovocytes ou des embryons.
  • Risque de grossesses extra-utérines.

Facteurs Influant sur le Succès de la Ponction

Plusieurs facteurs peuvent influencer le succès de la ponction d'ovocytes et de la FIV :

  • Âge de la Femme : Chez la femme, la réserve d’ovules dans les ovaires diminue avec l’âge.
  • Qualité des Ovocytes et du Sperme : La qualité des gamètes est essentielle pour la fécondation et le développement embryonnaire.
  • Nombre d’Ovocytes Récupérés : Un nombre suffisant d'ovocytes matures augmente les chances de succès.
  • Technique de Fécondation : Le choix entre la FIV conventionnelle et l'ICSI dépend des caractéristiques du sperme.
  • Qualité du Laboratoire : Un laboratoire de PMA bien équipé et expérimenté est crucial.

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