La ponction de spermatozoïdes est une étape cruciale dans diverses techniques de procréation médicalement assistée (PMA). Cet article explore en détail les différentes méthodes de ponction de spermatozoïdes, en mettant en lumière les procédures, les indications et les aspects pratiques.
Insémination intra-utérine (IIU)
L'insémination artificielle intra-utérine consiste à injecter des spermatozoïdes "préparés" directement dans la cavité utérine. Cette préparation implique une sélection des spermatozoïdes les plus mobiles et les plus aptes à féconder l'ovocyte. Un fin cathéter est utilisé pour introduire les spermatozoïdes à travers le col de l'utérus, à un moment précis du cycle menstruel de la femme.
Déroulement de l'IIU
L'IIU peut être réalisée en cycle spontané, sans stimulation ovarienne préalable, ou avec un traitement hormonal léger pour stimuler l'ovulation. Les spermatozoïdes utilisés peuvent provenir du conjoint ou d'un donneur. Le geste est généralement indolore.
En pratique : les étapes de l'IIU
- Début des traitements : Contacter les infirmières au premier jour des règles et commencer le traitement selon les indications.
- Monitorage : Un premier rendez-vous de monitorage a lieu environ 8 jours après le début du traitement. Les infirmières communiquent la date du rendez-vous. Les informations concernant la suite des traitements et le jour du déclenchement sont indiquées au cours de la surveillance ou par téléphone. La date du recueil de spermatozoïdes et de l'insémination est précisée au moment du déclenchement.
- Insémination : En cas d'insémination avec sperme du conjoint (frais ou congelé), le couple doit se présenter à 8h30 au laboratoire, muni de leurs pièces d'identité. En cas d'insémination avec sperme de donneur, le couple ou la femme doit se présenter à 8h30 au laboratoire, muni(e)s de sa pièce d'identité.
- Suivi de grossesse : Un premier test de grossesse est réalisé 15 jours après l'insémination. En cas de résultat positif, il faut continuer les traitements prescrits et réaliser un nouveau test à 48h puis à une semaine, afin de vérifier la bonne évolution de la grossesse. Une première échographie est réalisée environ 6 semaines après l'insémination. En cas de résultat négatif, les traitements peuvent être arrêtés.
Fécondation In Vitro (FIV)
Le principe général de la Fécondation In vitro (FIV) est de réaliser la rencontre des gamètes (ovocytes et spermatozoïdes) en dehors de l’appareil génital de la femme, en les mettant en présence l’un avec l’autre au laboratoire. L’objectif est d’obtenir des embryons, qui pourront ensuite être placés dans l’utérus au cours du transfert embryonnaire.
Étapes clés de la FIV
- Stimulation ovarienne : La FIV est souvent précédée d'une stimulation ovarienne pour recueillir plusieurs ovocytes.
- Ponction ovarienne : Cette procédure permet de recueillir les ovocytes matures. Elle est réalisée 34 à 36 heures après l’injection de l’hormone hCG, juste avant que l’ovulation ne se produise. La patiente est accueillie en hôpital de jour, à jeun depuis minuit. Les seringues contenant le liquide folliculaire sont ensuite confiées au biologiste.
- Recueil de sperme : Un recueil de sperme frais est effectué le même jour, ou du sperme congelé est décongelé. Le recueil de sperme s’effectue le matin même de la ponction, au laboratoire, dans une pièce réservée à cet effet. Une abstinence sexuelle est recommandée.
- Fécondation in vitro : Les ovocytes sont fécondés "in vitro" avec les spermatozoïdes sélectionnés.
Techniques de fécondation in vitro
- FIV "classique" : Les ovocytes sont mis en fécondation avec les spermatozoïdes préparés. Au bout de 18 à 20h, les ovocytes sont observés afin de confirmer ou non la rencontre normale entre ovocytes et spermatozoïdes.
- FIV avec ICSI (Injection Intracytoplasmique de Spermatozoïdes) : Un spermatozoïde est injecté directement dans le cytoplasme de l'ovocyte à l'aide d'une micro-pipette. Au bout de 18h, les signes de fécondation sont observés. L’ICSI est une technique où l’on va choisir un seul spermatozoïde pour l’injecter en laboratoire dans un ovocyte et essayer d’avoir un embryon pour ensuite le replacer dans l’utérus de la femme.
Culture embryonnaire
Les embryons sont conservés dans un environnement contrôlé, reproduisant les conditions naturelles, pour assurer un développement optimal. Ils sont régulièrement observés pour évaluer leur évolution et leur morphologie. Les embryons sont conservés au laboratoire jusqu’à leur transfert et/ou leur congélation, qui peuvent avoir lieu soit à J2 ou J3 (c’est-à-dire 2 et 3 jours après la ponction), soit après culture prolongée jusqu’à J5/6, au stade de blastocyste.
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Transfert embryonnaire
Un ou deux embryons sont placés dans la cavité utérine. Le gynécologue dépose le(s) embryons(s) préalablement choisis par le biologiste dans l’utérus, grâce à un fin cathéter introduit par le col utérin sous contrôle échographique. La politique du SET "Single Embryo Transfer" (transfert d'un seul embryon congelé est adoptée par l'équipe d'AMP de l'hôpital Tenon, en dehors de certaines situations particulières. Afin de faciliter le transfert embryonnaire, il conviendra de venir la vessie pleine.
Congélation embryonnaire
La congélation permet de conserver les embryons en vue de leur transfert ultérieur. Les embryons congelés sont conservés dans l’azote liquide à -196°C dans des cuves de stockage prévues à cet effet. Le développement de la technique de vitrification a permis d’obtenir d’excellents résultats avec, actuellement, des taux de grossesse après transfert d’embryons congelés comparables à ceux après transfert d’embryons non congelés.
En pratique : les étapes de la FIV
- Début des traitements : Contacter les infirmières au premier jour des règles et commencer le traitement selon les indications.
- Monitorage : Un premier rendez-vous de monitorage a lieu environ 8 jours après le début du traitement. Les infirmières communiquent la date du rendez-vous. Les informations concernant la suite des traitements et le jour du déclenchement sont indiquées au cours de la surveillance ou par téléphone. La date du recueil de spermatozoïdes et de la ponction est précisée au moment du déclenchement.
- Ponction d'ovocytes : La ponction ovocytaire a lieu au 1er étage du bâtiment Le Lorier. Les démarches administratives et l'heure d'arrivée sont communiquées au cours du monitorage. Il est obligatoire d'avoir un accompagnant pour la sortie le jour de la ponction. La suite de la prise en charge (nécessité de congélation totale des embryons "freeze-all" ou transfert embyonnaire frais) est communiquée à la sortie, ainsi que le nombre d'ovocytes recueillis. Le laboratoire appelle les jours suivants la ponction afin de donner les informations de l'évolution en culture des embryons.
- Transfert embryonnaire : En cas de nécessité de "freeze-all" (congélation totale des embryons), la patiente est recontactée pour la programmation de son transfert embryonnaire. En cas de transfert frais : la patiente doit prendre les traitements indiqués à commencer le soir de la ponction. Le rendez-vous pour le transfert embryonnaire est communiqué par les médecins biologistes (le plus souvent 5 jours après la ponction ovocytaire). Il faut alors se rendre au laboratoire, muni(es) de sa pièce d'identité.
- Suivi de grossesse : Un premier test de grossesse est réalisé 13 jours après le transfert embryonnaire. En cas de résultat positif, il faut continuer les traitements prescrits et réaliser un nouveau test à 48h puis à une semaine, afin de vérifier la bonne évolution de la grossesse. Une première échographie est réalisée environ 6 semaines après le transfert. En cas de résultat négatif, les traitements peuvent être arrêtés.
En pratique : les étapes du transfert d'embryon congelé
- Début des traitements : Contacter les infirmières au premier jour des règles et commencer le traitement selon les indications.
- Monitorage : Un premier rendez-vous de monitorage a lieu environ 8 jours après le début du traitement. Les infirmières communiquent la date du rendez-vous. Les informations concernant la suite des traitements +/- le jour du déclenchement sont indiquées au cours de la surveillance ou par téléphone. La date du transfert embryonnaire est précisée au moment du monitorage.
- Transfert : En cas de projet en couple : le couple doit se présenter à 8h30 au laboratoire, muni(e)s de leurs pièces d'identité. En cas de projet femme solo : la femme doit se présenter à 8h30 au laboratoire, munie de sa pièce d'identité.
- Suivi de grossesse : Un premier test de grossesse est réalisé 13 jours après le transfert embryonnaire. En cas de résultat positif, il faut continuer les traitements prescrits et réaliser un nouveau test à 48h puis à une semaine, afin de vérifier la bonne évolution de la grossesse. Une première échographie est réalisée environ 6 semaines après le transfert. En cas de résultat négatif, les traitements peuvent être arrêtés.
Techniques avancées : ICSI et IMSI
ICSI (Injection Intracytoplasmique de Spermatozoïdes)
L'ICSI est une technique de FIV où un seul spermatozoïde est injecté directement dans l'ovocyte. Elle est particulièrement utile en cas de problèmes de sperme. La couronne de cellules qui entoure l’ovocyte est enlevée pour visualiser l’endroit où va se faire la micro-injection : c’est la « décoronisation ». La capacité des ovocytes à être fécondés est évaluée de manière plus précise. Seuls les ovocytes matures seront micro-injectés. Pour chacun des ovocytes, un spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. Sous contrôle d’un microscope, le biologiste maintient l’ovocyte avec une micropipette et, avec une autre micropipette, aspire le spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. sélectionné puis l’injecte à l’intérieur de l’ovocyte. Cette micro-injection est renouvelée pour chaque ovocyte fécondable. Les ovocytes sont ensuite remis dans une boîte de culture dans l’incubateur à 37° C pour les étapes suivantes.
IMSI (Injection Magnifiée de Spermatozoïde)
L’IMSI (Injection Magnifiée de Spermatozoïde) suit le même procédé que l'ICSI, à la seule différence que l’observation des spermatozoïdes se fait avec un microscope spécial. Il est alors possible grâce à l’IMSI, d’observer des détails qui ne sont pas visibles autrement. Par exemple, la structure de la tête. Si celle-ci présente des vacuoles (sortes de petits cratères), cela laisse supposer qu’il est probable que la fragmentation de l’ADN du sperme est trop importante pour permettre une naissance.
Facteurs influençant la fécondation
- En règle générale, on peut dire qu’un ovocyte tout à fait mature est fécondé ; un ovocyte incomplètement mature a moins de chances de débuter une fécondation et, s’il la débute, il a moins de chances de la terminer ; un ovocyte totalement immature a très peu de chances de débuter une fécondation et il ne la finit pas.
- En FIV classique, la diminution de la qualité du sperme entraîne une diminution du taux de fécondation. Ainsi, toutes tentatives confondues (donc avec des ovocytes de maturité diverse), le taux de fécondation est de 66 % avec un sperme de bonne qualité et il décroît jusqu’à 0 % avec un sperme de très mauvaise qualité. En ICSI, la qualité du sperme ne joue en principe pas, la fécondance étant court-circuitée par la technique elle-même.
- On peut savoir s’il y a eu fécondation si deux petits noyaux sont nettement visibles au centre de l’ovocyte, l’un d’entre eux est le noyau mâle, l’autre le noyau femelle.
Aspects pratiques et conseils
- Préparation à la ponction : La ponction sera réalisée 34 à 36 heures après l’injection de l’hormone hCG. Vous êtes accueillie, Madame, en hôpital de jour, à jeun depuis minuit (ne pas boire, ni manger, ni fumer), au sein du service d’AMP.
- Suivi psychologique : Ces moments sont particulièrement durs à vivre et à surmonter, d’où la présence de psychologues dans notre unité, qui sont à votre disposition pour des RDV rapides, en présentiel ou en téléconsultation.
- Traitement hormonal : Pour favoriser l’implantation, un traitement hormonal à base de progestérone, vous est prescrit. Il est à commencer dès le soir de la ponction.
Risques et complications
Des effets indésirables peuvent survenir en cours de traitement. On observe généralement un taux légèrement plus élevé de poids de naissance inférieur à la normale et de naissances prématurées chez les enfants conçus par FIV. Les complications liées au geste chirurgical de ponction (hémorragie, infection, problème anesthésique…) sont rarissimes. Celles qui sont liées à une réponse excessive à la stimulation ovarienne, appelée hyperstimulation, sont également rares.
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