La procréation médicalement assistée (PMA) offre des solutions aux couples hétérosexuels infertiles, aux couples de femmes et aux femmes seules qui désirent un enfant. Parmi les techniques de PMA, la fécondation in vitro (FIV) et l'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) sont couramment utilisées. Cet article explore en détail les techniques de récolte de spermatozoïdes dans le cadre de la FIV ICSI.
Introduction à la FIV ICSI
La fécondation in vitro (FIV) est une technique qui consiste à féconder un ovocyte avec un spermatozoïde « in vitro », c’est-à-dire en dehors du corps de la femme, en laboratoire. Les embryons qui en résultent sont ensuite transférés dans l’utérus à l’aide d’un fin cathéter. L'ICSI (injection intracytoplasmique de spermatozoïdes) est une variante de la FIV où un seul spermatozoïde est injecté directement dans l'ovocyte.
Dès qu’il y a des problèmes notables de sperme, une FIV dite ICSI est préférée à la FIV classique. La FIV avec ICSI représente désormais une part importante des FIV réalisées. Cette technique est particulièrement utile pour résoudre les problèmes graves d’infertilité masculine, tels que la tératospermie (anomalies morphologiques des spermatozoïdes) et l'oligospermie sévère (faible nombre de spermatozoïdes).
Recueil de Sperme pour l'ICSI
Recueil par Masturbation
Le recueil de sperme est une étape cruciale dans le processus de FIV ICSI. Le jour de l’insémination, le conjoint réalise un recueil de sperme par masturbation au laboratoire. Un délai d’abstinence préalable de 24 heures minimum à 7 jours maximum est conseillé. Le sperme est ensuite préparé afin de sélectionner les spermatozoïdes les plus fécondants.
Le biologiste examine au microscope l’éjaculat, c’est-à-dire l’échantillon de sperme recueilli. Il estime le nombre de spermatozoïdes et analyse leur morphologie et leur vitalité. Selon l’OMS, un sperme normal compte au minimum 15 millions de spermatozoïdes par ml, dont au moins 30 % sont mobiles et 15 % ont une forme normale.
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Obtention Chirurgicale de Spermatozoïdes
Dans certains cas, lorsque le sperme ne contient aucun spermatozoïde (azoospermie), il est possible de les recueillir directement via une chirurgie. La médecine actuelle permet d’obtenir des spermatozoïdes pour des techniques de reproduction assistée par de nombreuses méthodes, en améliorant les possibilités avec la diminution de l’agressivité et l’augmentation de la qualité des échantillons obtenus.
Ponction Testiculaire
La ponction testiculaire consiste à obtenir des spermatozoïdes directement du testicule ou de l’épididyme par aspiration avec une aiguille et avec de l’anesthésie locale. C’est un processus tolérable et avec peu de risque de complications.
Technique MESA
La Technique MESA (Aspiration des spermatozoïdes de l’épididyme par microchirurgie) a pour indications l’amélioration de la récupération des spermatozoïdes et la réduction de la quantité de tissu que nous extrayons du testicule. Une incision transversale est faite dans la région avasculaire de la portion centrale, sur la face intérieure, latérale ou moyenne en évitant les vaisseaux sanguins.
Biopsie Testiculaire
La biopsie testiculaire est une opération chirurgicale par laquelle les spermatozoïdes sont obtenus. Elle consiste à ouvrir 2-3 cm la peau du testicule afin d’obtenir de tissu testiculaire avec des spermatozoïdes. Le matériel testiculaire obtenu est fractionné ; une partie est destinée aux techniques de reproduction et l’autre partie à son étude. Généralement, cette opération est réalisée avec de la sédation, bien qu’elle puisse se faire avec de l’anesthésie locale selon la tolérance du patient.
Ce type de biopsie est utilisé généralement pour trouver le problème d’infertilité masculine lorsqu’un spermogramme montre l’existence des spermatozoïdes anormaux et des autres preuves n’ont pas trouvé la cause.
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Choix de la Technique d'Obtention
Le choix d’une des techniques ou de l’autre pour obtenir des spermatozoïdes se base sur des différentes conditions qui établissent la technique la plus appropriée. Les avantages de la ponction est l’obtention de tout le matériel nécessaire sans nuire aux testicules et elle est une technique plus économique. La qualité du matériel ne varie pas en fonction de la technique d’obtention employée, mais pour le matériel propre de chaque patient.
Processus de l'ICSI
Préparation des Ovocytes
La patiente recevra alors une stimulation hormonale pour faire mûrir de nombreux ovocytes. Le prélèvement des ovocytes (aussi appelé recueil, collecte ou ponction) dans les ovaires est pratiqué au bloc opératoire par un gynécologue 35 à 37 heures après le déclenchement de l'ovulation. La ponction se fait le plus souvent sous anesthésie générale légère (sédation), selon les cas peut être proposée une anesthésie locale.
La ponction se pratique par voie naturelle. Une aiguille, guidée par échographie endovaginale, permet d'aspirer le liquide contenu dans chaque follicule dans lequel baigne l'ovocyte. Chaque liquide folliculaire pouvant contenir un ovocyte est récupéré dans un flacon et immédiatement transféré au laboratoire.
Injection Intracytoplasmique
Après la collecte des ovules, l’embryologiste enlève les cellules du cumules entourant l’ovule pour libérer l’ovule pour l’injecte de sperme (ICSI). Cette technique consiste à "injecter directement un spermatozoïde dans l’ovocyte. Le processus de la micro-injection est réalisé par un biologiste, sous contrôle d’un microscope. Le spermatozoïde, grossi 200 à 400 fois, est aspiré dans une pipette, puis micro-injecté à l’intérieur de l’ovule, lui-même maintenu par une micro-aspiration. La micro-injection est renouvelée pour chaque ovocyte mature fécondable.
Culture et Transfert Embryonnaire
Après l’injection, ils sont placés à l’intérieur de l’incubateur dans une solution de sérum spécial ayant une température et une concentration de dioxyde de carbone appropriée et leur taux de fécondation et leur qualité de développement sont surveillées.
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Après la culture des embryons dans un environnement adapté pendant 2 à 5 jours, leur qualité est évaluée en tenant compte de leur aspect morphologique. Puis un ou deux embryons sont sélectionnés et placés dans la cavité utérine à l’aide d’un cathéter flexible.
Lors du transfert d’embryon, la patiente est allongée en position gynécologique. Le spéculum est inséré dans le vagin nettoyé avec un sérum physiologique et stérile. Par la suite, le col de l’utérus est nettoyé avec des liquides de culture spéciale. L’embryologiste apporte les embryons à transférer au moyen d’un cathéter du laboratoire. Le médecin qui réalisera la procédure pose les embryons dans l’utérus sous échographie abdominale. La procédure de transfert d’embryon n’est pas douloureuse et ne nécessite pas une anesthésie.
Après la procédure, des médicaments hormonaux sous forme d’injection, de suppositoires ou bien de crème sont donnés à la patiente afin de soutenir l’endomètre. Ce traitement, nommé soutien de la phase lutéale, continue en cas de grossesse jusqu’à la 10ème semaine.
Techniques Complémentaires
Test Aurora
Une équipe de scientifiques belges de la Vrije Universiteit Brussel (VUB) a mis au point une nouvelle méthode baptisée test Aurora. Elle permet de mieux évaluer la qualité des ovocytes. Ce test repose sur l’analyse en laboratoire des cellules corona. Car celles-ci entourent l’ovocyte. Ces cellules permettent d’identifier les ovocytes qui offrent les meilleures chances de grossesse et qui devraient donc être fécondés et implantés.
Éclosion Assistée
Afin de compléter son développement normal, il doit tout d’abord éclore de son enveloppe externe (que l’on appelle zone pellucide). L’objectif de l’éclosion assistée est d’affiner l’enveloppe externe de l’embryon avant le transfert, ainsi la chance d’une grossesse est augmentée en facilitant la fixation de l’embryon à l’utérus. Cette procédure est pratiquée par un procédé mécanique ou chimique ou à l’aide d’un rayon laser.
Transfert de Blastocyste
Le transfert d’embryon réalisé au 5ème ou au 6ème jour du développement de l’embryon durant la fécondation in vitro est appelé transfert de Blastocyste. Les embryons sont suivis selon leurs stades de développement dans le laboratoire et ceux qui ont atteint le stade de Blastocyste sonlectionnés et transférés sur la patiente.
Facteurs Influant sur le Succès de l'ICSI
Le succès de l'ICSI dépend de nombreux facteurs, notamment l'âge de la patiente, la qualité embryonnaire et la cause de l'infertilité. Certaines femmes tombent enceintes dès le premier cycle, d’autres après plusieurs tentatives. Il n’existe pas de règle générale.
Qualité du Sperme
Les spermatozoïdes contenus dans le sperme ne sont pas tous fécondants et de plus leur qualité est inégale. Si le sperme présente beaucoup de défauts, les biologistes peuvent utiliser un supermicroscope, qui grossit 6.000 fois, au lieu de 200, les spermatozoïdes.
Qualité des Ovocytes
La qualité des ovocytes est un facteur déterminant pour le succès de la FIV ICSI. Le test Aurora permet de mieux évaluer cette qualité en analysant les cellules corona entourant l'ovocyte.
Alternatives en Cas d'Échec de la FIV
Que faire si le processus de la FIV ne fonctionne pas ? En France, grâce aux Cecos (centres d’étude et de conservation des œufs et du sperme), le don de sperme fonctionne bien. La liste d’attente est certes un peu longue, mais il n’y a pas vraiment de problème.
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