Introduction
La fécondation in vitro (FIV) est une technique d'assistance médicale à la procréation (AMP) qui consiste à féconder un ovocyte avec un spermatozoïde en laboratoire. Cette technique est utilisée pour aider les couples infertiles à concevoir un enfant. La décoronisation des ovocytes est une étape importante de la FIV qui consiste à enlever les cellules qui entourent l'ovocyte, afin de faciliter la fécondation.
Les étapes de la FIV
La FIV comprend plusieurs étapes, dont :
La stimulation ovarienne : La stimulation ovarienne permet le développement de plusieurs follicules lors du cycle de stimulation et en conséquence, le recueil ultérieur de plusieurs ovocytes et l’obtention de plusieurs embryons. Une sélection du ou des 2 meilleurs embryons pour le transfert intra utérin est alors possible ce qui optimise les chances de succès. La stimulation ovarienne consiste en l'administration d'un médicament hormonal dans le but d'obtenir plusieurs follicules ovariens mûrs en même temps. De cette façon, il sera possible d'obtenir un plus grand nombre d'ovules à féconder et d'augmenter les chances de grossesse. La durée du protocole de stimulation est variable allant de 2 à 4 semaines.
La ponction folliculaire : La ponction folliculaire a lieu le surlendemain de la piqûre de déclenchement de l’ovulation. La ponction s’effectue par voie transvaginale sous contrôle échographique le matin. Elle dure en moyenne 10 minutes. La ponction folliculaire, également connue sous le nom de ponction ovarienne, consiste à aspirer le liquide contenu dans les follicules ovariens pour extraire les ovocytes mûrs par une ponction vaginale guidée par échographie. Il s'agit d'une simple opération de 30 minutes réalisée en salle d'opération sous anesthésie. Environ 30-34 heures avant la ponction ovarienne, la patiente doit s'injecter une dose d'hormone hCG pour déclencher l'ovulation et induire la maturation finale des ovocytes.
La décoronisation des ovocytes : Les ovocytes sont débarrassés du nuage de cellules qui les entourent (corona radiata). La décoronisation des ovocytes est l'élimination de la couche cellulaire de granulose qui entoure l'ovule mûr. Pour cela, ils sont placés dans un milieu contenant des enzymes destinés à dissocier et à disperser ces cellules. C’est l’étape de « décoronisation », qui est ensuite parachevée, au moyen de pipettes très fines. Il existe deux techniques pour décoroniser les ovocytes : La décoronisation chimique et la décoronisation mécanique.
Lire aussi: Cancer infantile et congélation d'ovocytes
- La décoronisation chimique: on utilise un milieu avec l'hyaluronidase, une enzyme qui dégrade l'acide hyaluronique qui lie les cellules de granulose ensemble. Dans la fécondation naturelle, l'hyaluronidase est sécrétée par le spermatozoïde afin de pénétrer dans l'ovocyte.
- La décoronisation mécanique: l'ovocyte est passé à travers des pipettes de différents calibres, du plus grand au plus petit diamètre, jusqu'à ce que toutes les cellules environnantes soient complètement détachées.
La fécondation : Les ovocytes et les spermatozoïdes sont mis en présence. Puis ovocytes et spermatozoïdes sont placés dans un milieu de culture favorable à leur survie et mis dans l’incubateur à 37°C. Pendant les heures qui suivent, certains spermatozoïdes vont traverser le cumulus (nuage de cellules) et s’attacher à la zone pellucide qui entoure l’ovocyte. La zone pellucide est une barrière importante et le spermatozoïde doit exercer des mouvements vigoureux pour la traverser. En général, un seul de ces spermatozoïdes parvient à traverser la zone pellucide, atteindre la surface de l’ovocyte et pénétrer dans l’ovocyte. La fécondation est réalisée par ICSI. La fécondation in vitro avec ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »…. consiste en l’injection d’un seul spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. dans l’ovocyte. L’ICSITechnique d’assistance médicale à la procréation (en anglais « Intra Cytoplasmic Sperm Injection »). On appelle également cette technique « micro-injection », « fécondation assistée » ou « fécondation avec micromanipulation »….
La culture embryonnaire : Après la fécondation et tout au long du développement embryonnaire, il est nécessaire d'évaluer les caractéristiques morphocinétiques des embryons afin de transférer ceux de meilleure qualité et avec une plus grande possibilité d'implantation. Selon le stade de développement de l'embryon, on évalue certains paramètres: Zygotes, Embryons de 2-3 jours, Blastocystes de 5-6 jours.
Le transfert embryonnaire : Le transfert embryonnaire s’effectue 5 ou 6 jours après la ponction (stade blastocyste). Le transfert est réalisé en fin de matinée. Le blastocyste à transférer est placé dans une goutte de milieu puis monté à l’extrémité d’un cathéter de transfert. Le geste du transfert est simple, rapide et indolore. Le médecin dépose le blastocyste à l’intérieur de la cavité utérine en passant par le col de l’utérus.
La décoronisation des ovocytes en détail
La décoronisation des ovocytes est une étape essentielle de la FIV, car elle permet aux spermatozoïdes d'accéder plus facilement à l'ovocyte et de le féconder. En effet, les cellules qui entourent l'ovocyte, appelées cellules de la corona radiata, forment une barrière physique qui empêche les spermatozoïdes d'atteindre la zone pellucide, la membrane protectrice de l'ovocyte.
Techniques de décoronisation
Généralement, les protocoles de laboratoire de FIV combinent les deux méthodes pour décoroniser plus efficacement les ovules.
Lire aussi: Recherches récentes sur les ovocytes
- Décoronisation chimique : Cette technique consiste à utiliser une enzyme, l'hyaluronidase, pour dissocier les cellules de la corona radiata. L'hyaluronidase est une enzyme naturellement présente dans le sperme, qui permet aux spermatozoïdes de traverser la corona radiata lors de la fécondation naturelle.
- Décoronisation mécanique : Cette technique consiste à utiliser des pipettes très fines pour enlever les cellules de la corona radiata. Les ovocytes sont aspirés et relâchés délicatement dans les pipettes, ce qui permet de détacher les cellules de la corona radiata.
Importance de la maturation ovocytaire
La maturation de l’ovocyte est en général achevée lors du recueil des ovocytes mais il arrive que quelques-uns des ovocytes soient encore immatures. En règle générale, on peut dire qu’un ovocyte tout à fait mature est fécondé ; un ovocyte incomplètement mature a moins de chances de débuter une fécondation et, s’il la débute, il a moins de chances de la terminer ; un ovocyte totalement immature a très peu de chances de débuter une fécondation et il ne la finit pas. Après la décoronisation, il faut vérifier si les ovules sont mûrs pour effectuer l'ICSI. Pour ce faire, il est nécessaire de visualiser le globule polaire dans l'espace péribitellin de l'œuf.
ICSI et IMSI : des techniques de fécondation assistée
L’ICSI (Injection Intra-Cytoplasmique de Spermatozoïde) est une technique de fécondation in vitro qui consiste à injecter un seul spermatozoïde directement dans l'ovocyte. Cette technique est utilisée lorsque le sperme de l'homme est de mauvaise qualité ou lorsque les ovocytes ont du mal à être fécondés par les spermatozoïdes. La couronne de cellules qui entoure l’ovocyte est enlevée pour visualiser l’endroit où va se faire la micro-injection : c’est la « décoronisation ». La capacité des ovocytes à être fécondés est évaluée de manière plus précise. Seuls les ovocytes matures seront micro-injectés. Pour chacun des ovocytes, un spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. Sous contrôle d’un microscope, le biologiste maintient l’ovocyte avec une micropipette et, avec une autre micropipette, aspire le spermatozoïdeCellule reproductrice masculine (gamète), qui possède une tête et une queue (le flagelle)…. sélectionné puis l’injecte à l’intérieur de l’ovocyte. Cette micro-injection est renouvelée pour chaque ovocyte fécondable. Les ovocytes sont ensuite remis dans une boîte de culture dans l’incubateur à 37° C pour les étapes suivantes.
L’IMSI (Injection Magnifiée de Spermatozoïde) suit le même procédé, à la seule différence que l’observation des spermatozoïdes se fait avec un microscope spécial. Il est alors possible grâce à l’IMSI, d’observer des détails qui ne sont pas visibles autrement. Par exemple, la structure de la tête. Si celle-ci présente des vacuoles (sortes de petits cratères), cela laisse supposer qu’il est probable que la fragmentation de l’ADN du sperme est trop importante pour permettre une naissance. Les premiers résultats montrent que cette technique est prometteuse : augmentation du taux d’implantation et diminution du taux de fausses couches.
Avantages et inconvénients de la MIV
La MIV (Maturation In Vitro) présente de réels avantages. La fécondation est réalisée par ICSI. Elle permet la maturation de l'ovocyte immature en ovocyte mature.
Cependant, les protocoles de congélation d'ovocytes sont onéreuses. La quantité d'ovocytes obtenus par ponction est plus faible. Les résultats obtenus après une MIV sont comparables à ceux obtenus après une FIVc.
Lire aussi: Aperçu de la conservation des ovocytes au Royaume-Uni
Risques et complications de la FIV
Des effets indésirables peuvent survenir en cours de traitement. On observe généralement un taux légèrement plus élevé de poids de naissance inférieur à la normale et de naissances prématurées chez les enfants conçus par FIV. Les complications liées au geste chirurgical de ponction (hémorragie, infection, problème anesthésique…) sont rarissimes. Celles qui sont liées à une réponse excessive à la stimulation ovarienneTraitement médicamenteux à base d’hormones (injections ou comprimés), permettant de stimuler la maturation d’un ou plusieurs follicules par chacun des ovaires…., appelée hyperstimulation, sont également rares. Elles se traduisent par un gonflement et des douleurs abdominales, une prise de poids brutale, des troubles digestifs et parfois une gêne respiratoire. Concernant les risques de cancer, aucune donnée ne permet aujourd’hui de mettre en cause les traitements liés à l’Assistance Médicale à la Procréation. La complication principale de la fécondation in vitro (FIV) est le syndrome d’hyperstimulation ovarienne.
tags: #décoronisation #des #ovocytes #protocole